人脐带间充质干细胞来源外泌体的生物学特性研究

被引：18

作者：

杨向荣 ^{[1
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丁娟 ^{[1
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徐正阳 ^{[1
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王珏 ^{[2
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纪红梅 ^{[1
]}

李玉云 ^{[3
]}

机构：

[1] 蚌埠医学院临床检验诊断学实验中心

[2] 蚌埠医学院第一附属医院

[3] 蚌埠医学院医学检验教研室

来源：

华中科技大学学报(医学版) | 2016年 / 45卷 / 02期

关键词：

间充质干细胞; 外泌体; 免疫调节; 增殖; 凋亡;

D O I：

暂无

中图分类号：

R329.2 [人体细胞学];

学科分类号：

100107 [人体解剖与组织胚胎学（人体解剖学、组织与胚胎学）];

摘要：

目的探讨正常人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stromal cells,hUC-MSCs)分泌的外泌体(exosomes)的免疫调节功能及对恶性肿瘤细胞体外增殖的影响。方法采用组织贴壁法分离培养hUC-MSCs,收集第3～6代hUC-MSCs上清液,使用超速离心法分离纯化exosomes;通过电子显微镜观察exosomes形态并分析其直径和直径分布范围等特征;采用流式细胞仪检测其表面hUC-MSCs来源的CD44、CD73标志物。将exosomes与正常人外周血单个核细胞共培养,采用MTT检测exosomes对淋巴细胞增殖的影响,ELISA法检测上清液中IL-4和INF-γ的分泌量。选择慢性粒细胞白血病(CML)K562细胞株,加入exosomes共培养,应用MTT法、PI/AnnexinⅤ双染流式法检测exosomes对癌细胞体外生长增殖、凋亡的影响。结果组织贴壁法成功分离hUC-MSCs,传代后呈长梭状生长。电镜观察分离得到的exosomes为椭圆形膜性小囊泡,经统计得出其直径在6.8～78.1nm之间,且分布比较集中。流式细胞术测得exosomes高表达黏附分子CD44(54.1%)与干细胞标志物CD73(31.5%),MTT和ELISA检测结果表明,不同浓度的exosomes均抑制外周血单个核细胞增殖且抑制细胞因子IL-4和INF-γ的分泌,呈现剂量依赖性。体外实验表明exosomes对K562细胞株具有抑制增殖、促进凋亡的作用。结论 hUC-MSCs来源的exosomes具有免疫调节作用及抑制K562细胞增殖的作用。

引用

页码：154 / 159

页数：6

共 6 条

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