目的:建立紫外-可见分光光度法(UV-VIS)整体考察补阳还五汤总黄酮含量方法,高效液相色谱法(HPLC)同时检测补阳还五汤总黄酮中毛蕊异黄酮、芒柄花素、羟基红花黄色素A的方法。方法:芦丁为对照品,波长272 nm,采用UV-VIS检测补阳还五汤总黄酮含量;色谱柱:Agilent Eclipse XDB-C18(4.6 mm×150mm,5μm);流动相:乙腈-0.04%磷酸水,梯度洗脱;柱温:30℃;流速:1 mL·min-1;检测波长:240 nm。结果纯化后的总黄酮纯度为63.1%,毛蕊异黄酮、芒柄花素、羟基红花黄色素A的线性范围分别为0.48~2.40μg·mL-1(R2=0.9991),0.93~4.66μg·mL-1(R2=0.9991),3.20~16.00μg·mL-1(R2=0.9990)。平均回收率分别为:99.02%,99.44%,98.59%,RSD为0.81%,0.78%,1.48%。结论:建立的检测方法简单便捷,重现性好,有利于补阳还五汤中总黄酮的质量控制。