高效液相色谱法测定肺组织中三磷酸腺苷含量

目的 :建立用高效液相色谱技术测定肺组织中三磷酸腺苷 (ATP)含量的分析方法 ,为临床肺保护和肺保存研究提供可靠的检测手段。方法 :肺组织经高氯酸溶液沉淀蛋白后制成匀浆液 ,上清液用氢氧化钾溶液调pH值为中性后 ,用反相离子对高效液相色谱法 (RP HPLC)测定ATP含量。色谱条件 :色谱柱用AgilentXDB C1 8柱 ,流动相为甲醇 KH2 PO4 缓冲液 (内含 4mmol LIPR A离子对试剂 ) ,在2 5 9nm紫外波长处检测。采用外标定量法计算ATP含量。结果 :此种方法使ATP在 8 5 18μmol L～170 3μmol L浓度范围内有良好的线性关系 (r =0 9994 ) ,方法的回收率为 97 8%～ 10 4 % ,日内精密度RSD <5 %。结论 :其方法快速、灵敏 ,具有较高的准确度和精密度 ,适用于人和动物肺组织中ATP含量的测定。