以正常人皮肤成纤维细胞滋养层培养人角质形成细胞的研究

目的探索和建立人皮肤成纤维细胞 (HDF)滋养层培养人角质形成细胞的技 术方法。方法在 HDF滋养层制备中，对丝裂霉素 C的较适浓度、同一株不同代数的 HDF滋养层、滋养层的 细胞密度对正常人表皮角质形成细胞（ NHEK）生长的影响及 NHEK的最低接种密度进行了初 步的探索。结果①终浓度为 10μ g/mL的丝裂霉素 C是制备 HDF滋养层的较适浓度。②同一 株 1～ 20代的 HDF滋养层对不同来源的 NHEK均有较好的促生长增殖作用， 1～ 20代 HDF 的培养代数与 9例 NHEK生长达 80％融合时间 (平均为 11.1 d)之间相关无显著性 (r=－0 .27,P >0.05)。③用 HDF滋养层培养 NHEK可减少原代培养 NHEK的接种量，用 NHEK最小接 种密度是 0.1× 104/cm2经 16 d的培养可达 80％的融合。结论同一株不同代的 HDF适用于不同来源的 NHEK培养。 HDF滋养层可促进 NHEK的生长，这可能 是它减少 NHEK原代培养接种量的原因之一。