手工组织显微切割食管癌不同病变阶段细胞提取高质量RNA

被引:4
作者
胡盛平
张可浩
沈忠英
吴名耀
邓小玲
杨捷生
方福德
机构
[1] 汕头大学医学院分子生物学中心,汕头大学医学院分子生物学中心,汕头大学医学院分子生物学中心,汕头大学医学院分子生物学中心,汕头大学医学院分子生物学中心,汕头大学医学院分子生物学中心,汕头大学医学院分子生物学中心汕头,汕头,汕头,汕头,汕头,汕头,汕头
基金
广东省自然科学基金; 教育部留学回国人员科研启动基金;
关键词
手工组织显微切割; 食管癌; RNA提取;
D O I
暂无
中图分类号
R735.1 [食管肿瘤];
学科分类号
100214 ;
摘要
目的建立手工组织显微切割方法准确挖取食管癌不同病变阶段细胞,从中提取高质量RNA,以满足后续基因表达分析的需要。方法常规制备冰冻组织切片,用无水乙醇一次性脱水固定,显微镜下用1ml注射器针头从组织冰冻切片中分别挖取不同病变阶段的细胞,用TRIzol提取总RNA。结果手工挖取面积可准确到1/25mm2,从挖取的细胞中提取出高质量的总RNA,凝胶电泳分析见清晰的18S和28SrRNA带,可满足后续分子水平研究的要求。结论无水乙醇固定冰冻组织切片可有效保存RNA的完整性,手工组织显微切割能够准确挖取小至1/25mm2面积的细胞,方法简单、易掌握、易操作,不须特殊仪器设备,适合在一般实验室推广应用。
引用
收藏
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共 2 条
[1]   组织显微切割技术及其应用 [J].
邓小玲 ;
胡盛平 .
汕头大学医学院学报, 2002, (03) :167-169
[2]  
实用生物体视学技术.[M].申洪;沈忠英编著;.中山大学出版社.1991,