MicroRNA-133b-5p通过靶向调控Fas基因影响H9c2心肌细胞凋亡

被引：11

作者：

程洁

何淑芳

韩正怡

朱海娟

张野

机构：

[1] 安徽医科大学第二附属医院麻醉科

来源：

安徽医科大学学报 | 2016年 / 51卷 / 02期

关键词：

心肌细胞; 微小RNAs; 乳酸脱氢酶; 凋亡; Fas;

D O I：

10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2016.02.009

中图分类号：

R542.2 [心肌疾病];

学科分类号：

100201 [内科学];

摘要：

目的研究microRNA(miR)-133b-5p在H9c2心肌细胞凋亡中发挥的作用及其靶向调控Fas基因的机制。方法取对数生长期大鼠H9c2胚胎心肌细胞,分为空白对照组、miR-133b-5p抑制剂组、抑制剂阴性对照组。分别转染48 h后收集细胞,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-133b-5p表达,微板法检测细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)活性,Annexin V-FITC联合PI双染流式细胞术检测细胞凋亡。双荧光素酶报告基因系统验证miR-133b-5p与Fas mRNA的3'UTR区的靶向结合。最后运用qRT-PCR和Westernblot分别检测各组Fas mRNA与Fas蛋白表达水平。结果miR-133b-5p抑制剂组细胞内miR-133b-5p表达水平下调至空白对照组的33%(P<0.05);LDH活性升高,细胞凋亡率增加,均明显高于空白对照组与抑制剂阴性对照组(P<0.05)。双荧光素酶报告基因证明Fas是miR-133b-5p的一个靶基因;miR-133b-5p inhibitor显著上调Fas mRNA和Fas蛋白水平(P<0.05)。结论利用化学合成miR-133b-5p inhibitor抑制大鼠H9c2心肌细胞中miR-133b-5p表达,可诱导心肌细胞损伤和凋亡,其机制可能与调控靶基因Fas表达有关。

引用

页码：189 / 194

页数：6

共 5 条

[1]

CCN1 enables Fas ligand-induced apoptosis in cardiomyoblast H9c2 cells by disrupting caspase inhibitor XIAP.[J].Bor-Chyuan Su;Fan-E Mo.Cellular Signalling.2014,

[2]

MicroRNA-133a Protects Against Myocardial Fibrosis and Modulates Electrical Repolarization Without Affecting Hypertrophy in Pressure-Overloaded Adult Hearts [J].