建立了雌酮、雌二醇、雌三醇、己烯雌酚、己烷雌酚和炔雌醇6种雌激素在生物体中的HPLC-MS/MS分析方法。采用加速溶剂萃取、固相萃取技术进行提取、富集及净化,有效降低了基质的干扰。以甲醇-0.1%氨水溶液为流动相,以C18色谱柱进行分离,质谱采用电喷雾负离子扫描模式,6种雌激素的回收率为88%~104%,相对标准偏差在1.3%~8.3%之间。雌酮、雌二醇、雌三醇在生物体中的方法检出限0.35ng/g;己烯雌酚、己烷雌酚、17α-乙炔基雌二醇在生物体中的方法检出限为0.13ng/g。方法适用于生物体内雌激素的分析和检测。