烟草花药特异启动子的克隆、活性测定及雄性不育基因和恢复基因的构建

采用聚合酶链式反应方法（ＰＣＲ），以烟草（ＮｉｃｏｒｉａｎａｔａｂａｃｕｍｃｖＳａｍｓｕｎ）叶片ＤＮＡ为模板扩增得到１．５ｋｂ花药特异启动子ＴＡ２９的基因片段。然后克隆到ｐＧＥＭ７Ｚｆ（＋）的ＳｍａⅠ位点上。序列分析结果表明，该基因片段两端２８０ｂｐ区段的碱基序列与资料报道的完全相同。经转化离体组织测定，该启动子具有花药特异启动活性。该启动子经与核酸酶Ｂａｒｎａｓｅ及其相应的抑制剂Ｂａｒｓｔａｒ基因分别融合后构建成雄性不育基因和恢复基因。