果实蛋白质组学研究的实验方法

被引:15
作者
王清 [1 ,2 ]
产祝龙 [1 ]
秦国政 [1 ]
田世平 [1 ]
机构
[1] 中国科学院植物研究所,光合作用与环境分子生理学重点实验室
[2] 中国科学院研究生院
关键词
果实; 凝胶染色; 等电聚焦; 裂解缓冲液; 蛋白质提取;
D O I
暂无
中图分类号
Q946 [植物生物化学];
学科分类号
071001 ;
摘要
双向电泳技术是蛋白质组学研究的基本方法之一。果实由于富含糖、多酚、单宁和有机酸等物质,蛋白质的提取比其它植物组织更加困难。本文主要介绍不同果实蛋白质的提取、等电聚焦系统和凝胶染色技术,并建立了一套适用于桃、樱桃、苹果、芒果和冬枣等多种果实蛋白质组学的研究方法。结果表明,采用匀浆法和酚抽提法提取果实的蛋白质,裂解缓冲液2溶解蛋白质,并用固相pH梯度进行等电聚焦,可以获得背景清晰和分辨率高的凝胶图谱,具有较好的重复性,可用于果实蛋白质组学的研究。我们的研究结果显示,固相干胶条与IEF管胶相比,具有更加明显的优势。而不同的染色方法,对结果影响不大。
引用
收藏
页码:107 / 116
页数:10
相关论文
共 3 条
[1]   Two-dimensional electrophoresis of membrane proteins using immobilized pH gradients [J].
Molloy, MP .
ANALYTICAL BIOCHEMISTRY, 2000, 280 (01) :1-10
[2]  
Membrane proteins and proteomics: Un amour impossible?[J] . VéroniqueSantoni,MarkMolloy,ThierryRabilloud.ELECTROPHORESIS . 2000 (6)
[3]  
Crucial role of antioxidant proteins and hydrolytic enzymes in pathogenicity of penicillium expansum: Analysis based on proteomic approach. Qin G, Tian S, Chan Z, et al. Molecular and Cellular Proteomics . 2007