烟草叶绿体16S启动子的克隆改造及转基因植株的获得

被引：5

作者：

山松

张中林

陈曦

刘春英

沈桂芳

机构：

[1] 中国农业科学院生物技术研究中心

[2] 浙江大学

来源：

作物学报 | 1999年 / 05期

关键词：

烟草; 16S启动子; 基因枪转化法; 叶绿体表达体系;

D O I：

暂无

中图分类号：

S572 [烟草（菸草）];

学科分类号：

摘要：

设计引物并克隆了烟草叶绿体16SrDNA基因的启动子,并在其下游加入了rbcL基因的SD序列,以使该启动子能有效翻译外源基因;进一步以aadA基因作为外源基因,以psbA基因的3’序列为终止子,构建成aadA基因表达盒;将此表达盒插入烟草叶绿体同源片段trnK-psbA-trnH中,构建成烟草叶绿体转化及表达载体P16T.用基因枪微弹轰击转化法,将该载体导人野生型大烟草叶绿体中,建立了烟草叶绿体遗传转化体系,转化频率为0.5株/枪.对转化植株进行PCR及遗传杂交实验分析,证明外源基因已在烟草叶绿体中稳定整合并遵循母系遗传规律.

引用

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