共 1 条
[1]
小鼠Osf2/Cbfa1基因的重组腺病毒构建及鉴定
被引：11
作者：
董世武
应大君
刘光久
朱楚洪
张伟
机构：
[1] 第三军医大学基础医学部解剖学教研室国家教育部生物力学与组织工程重点实验室生物力学研究室,第三军医大学基础医学部解剖学教研室国家教育部生物力学与组织工程重点实验室生物力学研究室,第三军医大学基础医学部解剖学教研室国家教育部生物力学与组织工程重点实验室生物力学研究室,第三军医大学基础医学部解剖学教研室国家教育部生物力学与组织工程重点实验室生物力学研究室,第三军医大学基础医学部解剖学教研室国家教育部生物力学与组织工程重点实验室生物力学研究室重庆,重庆,重庆,重庆,重庆
来源：
关键词：
腺病毒;
Osf2/Cbfa1基因;
同源重组;
D O I：
暂无
中图分类号：
R346 [];
学科分类号：
摘要：
目的构建小鼠Osf2/Cbfa1基因的重组腺病毒载体,并观察其对NIH3T3细胞的感染情况。方法采用基因工程技术,经过2次亚克隆将Osf2/Cbfa1基因片段克隆至穿梭质粒pAdTrack-CMV上,利用PAdEasy系统进行细菌内同源重组后,脂质体转染293T细胞包装、扩增,将重组腺病毒对成纤维细胞株NIH3T3进行感染。采用PCR方法对重组体腺病毒进行鉴定,利用穿梭质粒中带有绿色荧光蛋白GFP报告基因,对病毒滴度和感染效率进行监测。结果酶切鉴定及PCR结果证明Osf2/Cbfa1基因重组腺病毒载体成功,病毒滴度达(1.6×1012)pfu/ml,并对NIH3T3细胞有很强感染能力。结论应用细菌内同源重组法成功构建了含小鼠Osf2/Cbfa1基因的重组腺病毒载体。
引用
收藏
页码：1947 / 1950
页数：4
相关论文