黄藤ISSR反应体系的条件优化

被引：34

作者：

杨华 ^{[1
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宋绪忠 ^{[1
]}

尹光天 ^{[2
]}

白嘉雨 ^{[2
]}

甘四明 ^{[2
]}

机构：

[1] 浙江省林业科学研究院

[2] 中国林业科学研究院热带林业研究所

来源：

福建林学院学报 | 2006年 / 02期

关键词：

黄藤; ISSR; 优化;

D O I：

10.13324/j.cnki.jfcf.2006.02.013

中图分类号：

S647 [野生蔬菜]; S564.9 [];

学科分类号：

摘要：

在利用ISSR技术对黄藤进行分子生物学研究过程中,对影响PCR扩增效果的一些因素,如模板DNA浓度、Mg2+浓度、dNTPs浓度、Taq DNA聚合酶浓度、引物浓度以及退火温度等指标进行筛选和优化,获得用于黄藤ISSR-PCR分析最适宜的PCR反应条件:20μLPCR反应体积中含有1×缓冲液,20 ng模板DNA,2 mmol.L-1MgC l2,100μmol.L-1dNTP,1.5 U TaqDNA聚合酶,0.4μmol.L-1引物,2%甲酰胺,0.5 mmol.L-1亚精胺.扩增程序为:94℃预变性5 m in;再35个循环:94℃30 s,52℃45 s和72℃1.5 m in;最后72℃延伸7 m in.

引用

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