碱煮法:一种制备海洋浮游生物PCR模板DNA的实用方法

被引：6

作者：

刘泳

杨官品

机构：

[1] 中国海洋大学海洋生命学院

[2] 中国海洋大学海洋生命学院山东青岛

[3] 山东青岛

来源：

海洋科学 | 2004年 / 07期

关键词：

碱煮法; 浮游生物; 聚合酶链式反应;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q781 [目的基因的获得];

学科分类号：

071007 ; 0836 ; 090102 ;

摘要：

介绍了一种制备海洋浮游生物PCR模板DNA的方法———碱煮法。取少量海水样品(40μL) ,直接经0.25mol/LNaOH和99℃温育处理裂解细胞 ,从而得到环境样品总DNA。实验证明 ,该方法制备的模板DNA可用于细菌核糖体RNA、浮游植物叶绿体rbcL和浮游动物线粒体COI等基因的PCR扩增。但是 ,在使用通用引物扩增细菌基因时 ,假阳性很难避免。该法制备的模板DNA适用于扩增非细菌基因或者特异引物界定的细菌基因。该方法较传统制备方法快速、简便 ,样品需要量减少 ,适用于浮游生物分子遗传多样性研究

引用

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共 4 条

[1] 快速制备水稻基因组DNA PCR模板的煮沸法 [J].