NaCl诱导表达的盐藻果糖-1,6-二磷酸醛缩酶基因克隆及原核表达

被引:8
作者
张晓宁
王昊
曲志才
陈火英
叶鸣明
沈大棱
机构
[1] 复旦大学生命科学学院遗传学研究所
[2] 遗传工程国家重点实验室
[3] 基因多样性与设计农业中心
[4] 上海交通大学农学院
[5] 基因多样性与设计农业中心 上海
[6] 上海
关键词
盐藻; 盐胁迫; 果糖1; 6二磷酸醛缩酶; 基因表达;
D O I
10.15943/j.cnki.fdxb-jns.2002.05.019
中图分类号
Q946 [植物生物化学];
学科分类号
071001 ;
摘要
通过RACE技术克隆到盐藻(DunaliellasalinaTeod.)果糖 1,6 二磷酸醛缩酶(DsALDP)的全长cDNA.对其序列分析及在GeneBank中进行同源搜索,发现DsALDP基因属于果糖 1,6 二磷酸醛缩酶基因家族,其与植物叶绿体果糖 1,6 二磷酸醛缩酶(AldP)基因的一致性为73%~66%.Northern杂交结果及醛缩酶活性分析均表明它确为在盐诱导下特异表达.将DsALDPcDNA构建到pET32a载体上,转入E.coliBL21进行表达分析.IPTG诱导后可以检测到一62ku基因产物大量表达.经不同浓度NaCl处理,表达DsALDP基因产物的细菌耐盐性明显高于对照组.
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[1]   Application of suppression subtractive hybridization (SSH) to cloning differentially expressed cDNA in Dunaliella salina (Chlorophyta) under hyperosmotic shock [J].
Zhang, XN ;
Qu, ZC ;
Wan, YZ ;
Zhang, HW ;
Shen, DL .
PLANT MOLECULAR BIOLOGY REPORTER, 2002, 20 (01) :49-57