实时LAMP法快速检测食用植物油中的转基因成分CaMV-35S

被引：9

作者：

李向丽 ^{[1
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谭贵良 ^{[2
]}

刘垚 ^{[2
]}

林霖 ^{[3
]}

赖心田 ^{[3
]}

机构：

[1] 中山火炬职业技术学院生物医药系

[2] 广东省中山市质量计量监督检测所

[3] 深圳市计量质量检测研究院

来源：

现代食品科技 | 2014年 / 30卷 / 02期

关键词：

环介导等温扩增技术; 植物油; 转基因; CaMV-35S; 核酸提取;

D O I：

10.13982/j.mfst.1673-9078.2014.02.003

中图分类号：

O657 [仪器分析法（物理及物理化学分析法）]; TS227 [产品标准与检验];

学科分类号：

摘要：

环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)是一项新的DNA扩增技术,近年来已被成功应用于转基因作物中外源基因的检测分析。本文针对花椰菜花叶病毒35 S启动子(CaMV-35S)设计引物以及有效提取目标DNA后,首次建立了食用植物油中CaMV-35S启动子的LAMP检测方法。通过在DNA提取过程中加入正己烷乳化和加入共沉淀剂,获得了可以进行LAMP扩增的DNA片段,采用LAMP实时浊度法和染色法对扩增产物进行比较分析。着重对FIP/BIP引物、甜菜碱和Mg2+浓度等反应参数进行了优化。结果表明,LAMP方法能够在56 min内特异性地检测到CaMV-35S启动子,检测灵敏度比常规PCR高10倍,而且不需要特别的仪器设备,扩增产物可通过观察实时浊度曲线或通过SYBR Green I染色后借助肉眼对检测结果进行判断。该方法快速高效、操作简便、灵敏度高、检测结果准确,适合食用植物油中转基因成分的快速检测。

引用

页码：244 / 248+222 +222

页数：6

共 7 条

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