链球菌通用PCR检测方法的建立及应用附视频

被引:10
作者
杜海燕 [1 ]
李基棕 [1 ]
周碧君 [1 ,2 ]
王开功 [1 ,2 ]
杨颖 [1 ]
殷俊磊 [1 ]
文明 [1 ,2 ]
机构
[1] 贵州大学动物科学学院
[2] 贵州大学动物疫病研究所
关键词
链球菌; PCR; 反应体系;
D O I
暂无
中图分类号
S858.28 [猪];
学科分类号
0906 ;
摘要
为建立链球菌快速检测方法,根据链球菌延伸因子EF-Tu基因设计合成1对通用引物,对链球菌属及其他属细菌进行PCR检测。结果表明,所设计的通用引物对猪链球菌2型和无乳链球菌均能扩增出1条大小为197 bp的特异性DNA条带,而对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、粪肠球菌、大肠埃希氏菌、枯草芽孢杆菌、绿脓杆菌、都柏林沙门氏菌和多杀性巴氏杆菌均呈阴性反应;经对PCR产物进行测序分析表明,扩增片段与GenBank上链球菌相应序列的同源性达90%98%;对链球菌DNA样本不同稀释度的检测显示,该PCR的最低检出量可达0.1 ng/mL;利用PCR检测方法对11株链球菌分离物进行检测,结果均能扩增出与预期大小相一致的目的条带,与传统生化鉴定结果符合率达到100%。这些结果表明,已成功建立了链球菌PCR检测方法,并可应用于临床链球菌的鉴定。
引用
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页数:3
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共 3 条
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