复合纤维素膜固定化胰蛋白酶反应器及其应用于蛋白质酶解

被引：14

作者：

姜泓海

邹汉法

汪海林

倪坚毅

张强

机构：

[1] 中国科学院大连化学物理研究所国家色谱研究分析中心!大连

[2] 中国科学院大连

来源：

高等学校化学学报 | 2000年 / 05期

关键词：

复合纤维素膜; 固定化胰蛋白酶; 生物反应器; 蛋白质降解; MALDI-TOF-MS;

D O I：

暂无

中图分类号：

O629 [天然化合物];

学科分类号：

摘要：

合成了甲基丙烯酸缩水甘油酯－纤维素复合膜，并以此膜为基质共价键合固定化胰蛋白酶，以Ｎ－苯甲酰－Ｌ－精氨酰乙酯（ＢＡＥＥ）为底物，应用高效液相色谱系统测定了酶固定化膜柱的催化反应特性．研究结果表明：温度、ｐＨ值、离子强度、有机溶剂及蛋白变性剂等都对固定化酶的活力有一定的影响．在最适条件下，固定化胰蛋白酶的活力为１７８００Ｕ／ｇ干膜，蛋白载量为３．６ｍｇ／ｇ（≈０．１５ μｍｏｌ／ｇ）干膜，活性回收率达到５２％．固定化酶表现出较高的使用和储藏稳定性，在４０℃下，水解ＢＡＥＥ底物２４ｈ活力无显著变化．固定化酶膜柱在４ ℃冷藏保存１００ｄ仍保存９０％以上的水解活力．固定化酶反应器被应用于蛋白质酶解的肽谱实验．

引用

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