非洲猪瘟病毒衣壳蛋白P72在大肠杆菌中的表达

被引：6

作者：

李维彬 ^{[1
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蒋正军 ^{[1
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王玉炯 ^{[2
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许崇波 ^{[2
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龚振华 ^{[1
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刘俊辉 ^{[1
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郭福生 ^{[1
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郑增忍 ^{[1
]}

机构：

[1] 农业部动物检疫所

[2] 宁夏大学生物技术重点实验室

来源：

中国预防兽医学报 | 2006年 / 03期

关键词：

非洲猪瘟病毒; 衣壳蛋白P72; 表达;

D O I：

暂无

中图分类号：

S852.651 [];

学科分类号：

090601 ;

摘要：

利用PCR技术,从含非洲猪瘟(ASFV)P72基因的克隆质粒BBBBPr4中扩增出1.94kb的P72基因。将P72基因和表达载体pET-30c(+)分别用限制性核酸内切酶FbaⅠ/XHoⅠ和BamHⅠ/XHoⅠ进行双酶切,然后在T4DNA连接酶作用下,将P72基因定向克隆至载体pET-30c(+)中相应位点上,并转化至宿主菌BL21(DE3)中,得到了重组菌株BL21(DE3)(pET-ASFVP72)。经PCR鉴定,构建的重组菌株中含有P72基因。重组菌株BL21(DE3)(pET-ASFVP72)经IPTG诱导后,其表达产物经SDS-PAGE和Westernblot分析,结果表明衣壳蛋白P72基因可以在受体菌中高效表达,达到了菌体总蛋白的34%,表达产物的分子量约为78Ku,并能被ASFV抗体所识别。

引用

页码：267 / 270

页数：4

共 3 条

[1] 非洲猪瘟间接ELISA诊断试剂盒的研究 [J].

蒋正军 ;

马世东 ;

蔡丽娟 ;

单文鲁 ;

王树双 ;

尹燕博 ;

龚振华 ;

李葳 ;

宣华 .

中国预防兽医学报, 2000, (S1) :107-113

[2] Strong sequence conservation of African swine fever virus p72 protein provides the molecular basis for its antigenic stability [J].

Yu, M ;

Morrissy, CJ ;

Westbury, HA .

ARCHIVES OF VIROLOGY, 1996, 141 (09) :1795-1802

[3]

A frican sw ine fever virus structure protein P72contains a conform ational neutralizing epitope. Borca M V,Irusta P,Carrillo C,et al. Virology . 1994

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