鉴定五类致泻性大肠埃希菌和志贺菌的多重PCR方法

目的建立一种快速鉴定和鉴别五类致泻性大肠埃希菌和志贺菌的多重PCR方法。方法利用五类致泻性大肠埃希菌和志贺菌的毒力基因stx1、stx2、eaeA、lt、stIb、aggR、ipaH及16SrRNA基因rrs,建立8重PCR反应体系,并对PCR引物、反应体系和循环条件进行优化。结果 8对PCR引物均能特异地扩增相应的基因。对本实验室87株大肠埃希菌及志贺菌的检测结果与先前应用单重PCR的鉴定结果完全一致。结论采用内对照基因和毒力基因建立的多重PCR方法既能在一个反应体系中鉴定和区分五类致泻性大肠埃希菌和志贺菌,又能评价PCR体系的反应效率,为五类致泻性大肠埃希菌的快速鉴定和鉴别提供了一种有效检测手段。