APAAP高敏感信号放大技术在乳腺癌HPV DNA原位杂交检测中的应用附视频

目的　探讨原位杂交 APAAP信号放大技术检测福尔马林固定 石蜡包埋乳腺癌组织HPV感染的实用性。方法　利用HPV通用型及亚型特异性探针 ,设定 4种杂交检测程序对 73例进展期乳腺癌和 34例乳腺良性病变进行HPVDNA原位杂交 APAAP信号放大检测。结果　在适宜的杂交程序下 ,39 19%的乳腺癌病例检测到HPVDNA ;良性病变中仅 1例 (2 94 % )纤维腺瘤检测到HPVDNA ,明显低于乳腺癌组 (P <0 0 1)。乳腺的大汗腺样化生区有细胞核阴性 细胞浆着色的假阳性反应 ,假阳性反应不足以被 1mmol L左旋咪唑阻断 ,但能被 0 2mol L盐酸前处理所消除。APAAP信号检测各步骤间的不同缓冲液可影响杂交结果。结论　只要杂交条件得当 ,原位杂交 APAAP检测技术在乳腺组织HPV感染研究中可获得满意结果。乳腺大汗腺样化生区内源性碱性磷酸酶含量较高 ,低浓度盐酸前处理有消除内源性碱性磷酸酶作用。