珍稀濒危植物香果树RAPD反应条件的优化

被引:5
作者
杨敬元 [1 ]
熊丹 [2 ]
梁宏伟 [2 ]
王玉兵 [2 ]
廖明尧 [2 ]
陈发菊 [2 ]
机构
[1] 湖北省神农架自然保护区管理局
[2] 三峡大学生物技术中心-湖北省天然产物利用与研究重点实验室
关键词
植物学; 香果树; 基因组DNA; 随机扩增多态性DNA;
D O I
暂无
中图分类号
S792.99 [其他];
学科分类号
摘要
以采自湖北省神农架地区的14株香果树Emmenopterys henryi为材料,提取其叶片基因组DNA,并以其基因组DNA为模板进行随机扩增多态性DNA(RAPD)反应条件的优化。RAPD反应条件中的各个因子,包括模板DNA质量浓度、引物浓度、dNTP浓度、DNA聚合酶浓度和Mg2+浓度。结果表明,香果树基因组DNA在以下条件有较好的扩增效果:25μL体系中,Taq酶1.33×10-3kat.L-1;随机引物0.5μmol.L-1;Mg2+2.6 mmol.L-1;dNTP 220μmol.L-1;DNA模板4.40 mg.L-1。聚合酶链式反应(PCR)程序为:94℃预变性5 min,94℃变性1 min,43℃退火1 min,72℃延伸2 min,经过40个循环,最后72℃延伸8 min。此体系和反应程序可获得比较稳定的扩增结果。图6表1参8
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