常规RT-PCR与荧光定量RT-PCR检测GⅠ、GⅡ型诺如病毒方法的建立及其应用

被引:16
作者
钱明明 [1 ]
许海燕 [2 ]
宗晴 [1 ]
阴甜甜 [1 ]
杨文彬 [1 ]
宋召军 [1 ]
黄金林 [1 ]
焦新安 [1 ]
机构
[1] 扬州大学人畜共患病重点实验室
[2] 南通市疾病预防控制中心
关键词
常规RT-PCR; 荧光定量RT-PCR; GI、GII型诺如病毒;
D O I
暂无
中图分类号
R440 [];
学科分类号
100208 ;
摘要
目的建立GI、GII型诺如病毒的常规RT-PCR和荧光定量RT-PCR检测方法,并对两种方法进行应用。方法优化筛选出最佳PCR反应体系与反应条件,并从灵敏性、特异性、临床样品检测等方面对建立的方法进行比较与评价。结果该两种方法特异性强,与札幌病毒、轮状病毒、星状病毒、腺病毒同时检测无交叉反应,同一体系内GI、GII型诺如病毒相互之间没有干扰;常规RT-PCR最低检测限为103copies/μL,荧光定量RT-PCR最低检测限为102copies/μL;对180份临床粪便样品进行检测,常规RT-PCR则检测率为5.56%(10/180),符合率达97.22%,荧光定量RT-PCR检测率为8.33%(15/180),符合率达100%;对15份阳性样品测序分析,证实均为诺如病毒。结论建立的常规RT-PCR与荧光定量RT-PCR均可用于诺如病毒的快速检测,荧光定量RT-PCR更为灵敏。
引用
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页码:602 / 606+611 +611
页数:6
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