琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳技术检测小麦基因组DNA RAPD扩增产物的方法学比较

通过 2 0 % (w v)的琼脂糖凝胶和 5 % (w v)的聚丙烯酰胺凝胶电泳对小麦白粉病抗、感特性品种基因组DNA的RAPD检测结果表明 :5 %聚丙烯酰胺凝胶对线性DNA分子 ( 0 1～ 2 0kb)和长度相差 1 0 0bp以下的DNA分子的分离较 2 0 %的琼脂糖凝胶电泳效果好。因此 ,我们研究出了一项利用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测小麦白粉病抗、感特性的新技术 ,在工作中建立了一种适合于检测小麦基因组DNA结构差异的电泳方法。该方法主要包括 :( 1 )丙烯酰胺和亚甲基双丙烯酰胺的新配比 ;( 2 )分离DNA片段的最佳凝胶浓度 ;( 3)电泳条件 ;( 4 )脱色、漂洗、银染、显色过程。实验发现 ,该技术对于小麦白粉病抗、感特性检测中的小片段和长度相差 1 0 0bp以下的线性DNAPCR扩增结果的分辨效果较好。应用该技术在抗感品种间已经发现了DNA水平上的差异。