猪6种常见病毒多重PCR检测方法的建立及应用

被引:4
作者
罗宁 [1 ,2 ]
王冬冬 [1 ]
杨宗统 [1 ]
孙举 [1 ]
徐守振 [1 ,3 ]
王守春 [2 ]
尹燕博 [1 ,3 ]
徐彪 [2 ]
机构
[1] 青岛农业大学动物科技学院
[2] 山东出入境检疫检验局/食品农产品检测中心
[3] 澳兰百特生物工程有限公司
关键词
猪繁殖与呼吸综合征病毒; 猪瘟病毒; 猪伪狂犬病病毒; 猪圆环病毒2型; 猪细小病毒; 猪巨细胞病毒; 多重PCR;
D O I
10.16437/j.cnki.1007-5038.2016.12.001
中图分类号
S858.28 [猪];
学科分类号
摘要
旨在建立一种可同时检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)、猪细小病毒(PPV)和猪巨细胞病毒(PCMV)的多重PCR检测方法。参考相关文献及序列比对结果设计6对特异性引物,建立了可同时检测以上6种病毒的多重PCR方法并应用此方法对临床病例进行了检测。结果表明,所建立的多重PCR方法灵敏度高,对6种病毒的最低核酸检测量分别为12.8pg(PRRSV)、46pg(CSFV)、16pg(PRV)、23.5pg(PCV-2)、72pg(PPV)、8.6pg(PCMV),对猪流感病毒(SIV)、猪乙型脑炎病毒(JEV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪轮状病毒(PoRV)无特异性扩增。应用该方法对临床145份样品进行检测,总阳性率为83.45%,2种以上病毒混合感染阳性率为69.66%。说明所建立的多重PCR检测方法敏感,可用于猪群中上述6种猪病病原的单一感染或混合感染的鉴别诊断。
引用
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