实时荧光定量PCR检测新生隐球菌DNA方法的建立

被引：2

作者：

程鹏飞 ^{[1
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蒋晓迪 ^{[1
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曹轩 ^{[1
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赵友云 ^{[1
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王业富 ^{[1
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江小明 ^{[2
]}

杨永 ^{[2
]}

机构：

[1] 武汉大学生命科学学院/病毒学国家重点实验室

[2] 武汉产品质量监督检验所

来源：

武汉大学学报(理学版) | 2010年 / 56卷 / 03期

关键词：

新生隐球菌; DNA; 实时荧光定量PCR;

D O I：

10.14188/j.1671-8836.2010.03.022

中图分类号：

R440 [];

学科分类号：

摘要：

以新生隐球菌DNA中一段高度保守序列为目的序列,结合PCR和DNA探针技术优点,设计出特异引物和探针,并优化新生隐球菌荧光定量PCR反应体系,研究出实时荧光定量PCR检测技术检测新生隐球菌DNA的方法.结果显示:标准株及临床样本株新生隐球菌保守序列为124 bp;重组质粒pUCM-T中目的基因片段序列碱基符合率100%;当质粒标准品浓度1.0×103～1.0×107Copies/mL时,相关系数为0.997,有很好的线性关系;各浓度标准品的Ct值变异系数均小于5%,表明此技术的重复性好,用特异性引物扩增可检测出5.0×102Copies/mL的新生隐球菌DNA,说明该方法敏感性很好.

引用

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