胡萝卜抗冻蛋白在大肠杆菌中的高效表达

被引:14
作者
张党权
刘兵
范云
何炎明
王金发
机构
[1] 中山大学生命科学学院教育部基因工程重点实验室
[2] 中山大学生命科学学院教育部基因工程重点实验室 广东广州
[3] 广东广州
基金
广东省自然科学基金;
关键词
胡萝卜Daucuscarota var. sativa; 抗冻蛋白; 表达; 包涵体; 诱导; 复性;
D O I
暂无
中图分类号
Q786 [基因的表达];
学科分类号
071007 ; 0836 ; 090102 ;
摘要
以pET - 11a为载体构建了胡萝卜抗冻蛋白非融合表达的重组质粒 ,并在大肠杆菌菌株BL2 1(DE3,pLysS)中成功地进行了高效表达。表达的蛋白质以包涵体的形式存在 ,相对分子质量为 36 80 0。经正交试验得到了优化的诱导表达条件。包涵体经各种缓冲液洗涤纯化、溶解、复性和超滤浓缩后 ,经SDS -PAGE电泳检测 ,纯度达单一带水平。生物学活性研究表明 ,重组表达的胡萝卜抗冻蛋白具有很强的热滞活性和提高细菌耐寒性的作用。
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相关论文
共 2 条
[1]   胡萝卜抗冻蛋白基因的克隆及其在E.coli中的表达 [J].
范云 ;
刘兵 ;
王宏斌 ;
王树启 ;
王金发 .
中山大学学报(自然科学版), 2002, (03) :52-55
[2]  
Proteolytic digestion of bacterial inclusion body proteins during dynamic transition between soluble and insoluble forms. MARIA M C, JOSE L C, ANTONIO V. Biochimica et Biophysica Acta . 1999