益气化瘀中药对大鼠椎间盘软骨细胞基因表达的影响

目的:观察正常培养、诱导凋亡以及益气化瘀中药干预后的大鼠椎间盘软骨细胞基因表达水平的变 化,研究益气化瘀中药对椎间盘凋亡软骨细胞基因表达谱的调节作用。方法:建立大鼠颈椎间盘软骨细胞培 养体系,使用抗Fas抗体诱导凋亡,分别从正常组、诱导凋亡组和益气化瘀中药组的大鼠颈椎间盘软骨细胞 中抽提mRNA,经反转录后分别用Cy3、Cy5荧光标记,获得椎间盘软骨细胞cDNA的探针,再与 BiostarR 40s的基因表达谱芯片杂交,ScanArray4000激光扫描仪扫描,GenePixPro3.0图像处理软件进 行图像分析、标准化处理和ratio值分析。结果:诱导凋亡组与正常组比较,共筛选出30条表达有差异的已 知基因,20条基因表达量明显下降(ratio<0.5),10条基因表达量明显上升(ratio>2);中药组与凋亡组比 较,共筛选出97条表达有差异的已知基因,中药上调44条基因(ratio>2),下调53条基因(ratio<0.5),涉 及到丝分裂素激活蛋白激酶(mitogen activatedproteinkinase,MAPK)和信号转导和激活因子(signal transducerandactivatoroftranscription,STAT)。结论:益气化瘀中药对椎间盘凋亡软骨细胞的调控涉及 多个方面,其对MAPK和JAK STAT通路的影响可提示益气化瘀中药对信号转导通路的调控作用。这从 一个侧面探索了中医气血理论与信号转导的关系。