半定量RT-PCR法分析猪肝脏中铜锌超氧化物歧化酶mRNA表达水平

被引:2
作者
胡迎利 [1 ]
徐春兰 [2 ]
汪以真 [2 ]
机构
[1] 河南省郑州牧工专科学校
[2] 浙江大学饲料科学研究所教育部分子营养重点实验室
关键词
铜锌超氧化物歧化酶(CuZnSOD); RT-PCR; 肝脏; 猪;
D O I
暂无
中图分类号
S828 [猪]; Q78 [基因工程(遗传工程)];
学科分类号
0905 ; 071007 ; 0836 ; 090102 ;
摘要
细胞内铜锌超氧化物歧化酶(CuZnSOD)是动物体内一种重要的抗氧化酶。本实验室构建了优化的半定量RT-PCR法,以18S rRNA为内标,研究猪肝脏组织中CuZnSOD基因mRNA表达水平。提取猪肝脏组织总RNA,经反转录后进行扩增,先寻求PCR线性扩增范围,确定RT-PCR的最佳循环数和Mg2+浓度。扩增后用VDS摄像系统扫描PCR扩增产物的电泳条带灰度。通过CuZnSOD PCR产物的灰度与18S rRNA PCR产物的灰度之比,即可计算出CuZnSOD mRNA的相对含量。
引用
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