兔抗Cap43多克隆抗体制备和初步纯化

被引:7
作者
何萍 [1 ]
张斯 [2 ]
尹元琴 [1 ]
隋承光 [1 ]
孟凡东 [1 ]
王晓华 [1 ]
张志强 [1 ]
姜又红 [1 ]
机构
[1] 中国医科大学附属第一医院肿瘤研究所
[2] 哈尔滨市红十字中心医院
关键词
Cap43; 半抗原; 多克隆抗体; 斑点ELISA; 辛酸-硫酸铵;
D O I
暂无
中图分类号
R392 [医学免疫学];
学科分类号
100102 ;
摘要
目的制备兔抗Cap43多克隆抗体。方法以30个氨基酸组成的多肽为半抗原与钥孔血蓝蛋白(mcKLH)通过碳化二亚胺(EDC)法化学偶联成完全抗原(多肽-mcKLH)免疫家兔;制备兔抗Cap4443多克隆抗体;斑点ELISA法检测抗体效价,经辛酸-硫酸铵法初步纯化抗体后,十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)电泳考马斯亮蓝检测其纯化后的纯度。结果经免疫11周得到兔抗Cap43多克隆体,抗体效价为1:500。结论采用EDC化学偶联半抗原和大分子载体蛋白mcKLH,使其成为同时具有免疫原性与免疫反应性的完全抗原,用其免疫家兔获得多克隆抗体。
引用
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页数:3
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