呼吸道合胞病毒糖蛋白F和G在同一个重组痘苗病毒中的表达

在使用痘苗病毒启动子P11k、P25k和P7.5k研究呼吸道合胞病毒(RSV)糖蛋白F和G表达效率的基础上,构建成功同时表达BSV F和G糖蛋白的重组痘苗病毒(VMS11G75F)。结果表明,11k和7.5k启动子可以象单独表达RSV F或G一样有效地同时表达RSVF和G。荧光检测显示,RSV F和G主要分布于细胞膜表面,部分RSVF分布于胞浆近核膜处。这种荧光分布特征在RSV F和G单独表达和同时表达的重组痘苗病毒中无明显差别。Westernblot表明,痘苗病毒表达的RSV糖蛋白G具有一条分子量约为90kD的弥散带,与RSV感染细胞产生的RSV G相同;RSVF除具有与RSV感染细胞产生的F1(48kD)和F2(20kD)相同的两种形式外,尚有少量未被蛋白酶水解的F0(6skD)。RSVF和G同时表达的重组痘苗病毒VMS11G75F经传15代后,在表达水平和基因组水平上都具有良好的遗传稳定性。