金黄色葡萄球菌核酸酶基因缺失突变株RN4220 Δnuc1的构建

被引：6

作者：

唐俊妮 ^{[1
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周锐 ^{[2
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史贤明 ^{[1
]}

康名松 ^{[2
]}

陈焕春 ^{[2
]}

机构：

[1] 上海交通大学农业与生物学院食品科学与工程系陆伯勋食品安全研究中心

[2] 华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室

[3] 四川大学生命科学学院四川大学动物疾病防控生物工程研究中心

来源：

中国生物工程杂志 | 2008年 / 11期

关键词：

金黄色葡萄球菌; nuc1; nuc2; 同源重组; 突变株构建;

D O I：

10.13523/j.cb.20081108

中图分类号：

Q789 [基因工程的应用];

学科分类号：

摘要：

金黄色葡萄球菌存在两个核酸酶编码基因,一个是葡萄球菌核酸酶(Staphylococcal nuclease,SNase),命名为nuc1,另一个是耐热核酸酶(Thermonuclease,TNase),命名为nuc2,nuc2是一个新的候选基因,以往认为金黄色葡萄球菌中的核酸酶只源于一个编码基因nuc1,为了进一步研究nuc2基因的功能,首先要将金黄色葡萄球菌nuc1基因缺失。研究目的就是通过构建同源重组质粒pBT2Δnuc1,将其电转入金黄色葡萄球菌菌株RN4220中,获得nuc1基因缺失突变株。经过了7轮培养和筛选,同源重组几率为2%(7/345),筛选出的nuc1突变株用PCR方法和RT-PCR进行了验证,从而获得了nuc1基因缺失突变株RN4220Δnuc1。

引用

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页数：5

共 14 条

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