不同脱细胞方法对无细胞真皮基质抗原成分的影响

被引:10
作者
姜笃银
钱春华
周兵
付小兵
机构
[1] 泰州市创伤整形研究所,泰州市第四人民医院烧伤整形外科,泰州市创伤整形研究所,泰州市第四人民医院烧伤整形外科,泰州市创伤整形研究所,泰州市第四人民医院烧伤整形外科,解放军总医院第三○四临床医学部全军创伤修复重点实验室江苏省泰州市,江苏省泰州市,江苏省泰州市,北京市
基金
国家自然科学基金重点项目;
关键词
皮肤; 免疫组织化学; 胰蛋白酶;
D O I
暂无
中图分类号
R329 [人体组织学];
学科分类号
100107 [人体解剖与组织胚胎学(人体解剖学、组织与胚胎学)];
摘要
目的:异体/异种真皮无细胞化可直接关系到移植后局部炎症反应-免疫反应程度和复合皮的质量,因而探索不同的脱细胞方法对无细胞真皮基质抗原成分的影响。方法:实验于1999-07/2000-07在第四军医大学动物实验外科完成。将人和小猪正常中厚皮肤经体积分数为0.002的戊二醛交联后,用1.25g/L胰蛋白酶、1.25g/Ldispase和高渗盐(3mol/LNaCl)分别与体积分数为0.005的TritonX-100依次或同时进行脱细胞处理24h,制成的脱细胞真皮基质(ADM),再通过组织学和免疫组化方法进行抗原性比较。结果:单独使用胰蛋白酶、dispase和NaCl处理能使表皮有效地移除,但真皮中仍有较多细胞残留,如将其与TritonX-100联合或再经Tri-tonX-100处理24h后,真皮组织内细胞相关抗原(HLA-ABC,HLA-DR,波形蛋白,结蛋白,肌动蛋白,Ⅷ因子相关抗原和细胞角蛋白)全部消失,并且细胞外基质成分(透明质酸、纤连蛋白、层粘连蛋白和Ⅳ型胶原)以及Ⅰ,Ⅲ和Ⅶ型胶原等抗原明显减弱。相比之下,戊二醛交联组和NaCl+TritonX-100处理的ADM浅层保留较多的Ⅳ型胶原、纤连蛋白和层粘连蛋白成分。各种方法制备ADM的抗原强弱依次为:NaCl(+TritonX-100)>dispase(+TritonX-100)>胰蛋白酶(+TritonX-100)。结论:采用胰蛋白酶联合去污剂制备ADM是一简单、经济和有效的脱细胞方
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