人骨髓间充质干细胞的分离和培养及向软骨细胞分化的实验研究

目的分离培养人骨髓间充质干细胞(hBMSCs),探讨其向软骨细胞分化的潜能。方法贴壁筛选法结合密度梯度离心法分离hBMSCs,据其生物学特征、定向分化潜能、表面标志物及流式细胞仪鉴定。在软骨细胞诱导液中诱导,通过甲苯胺蓝染色定性蛋白聚糖(PG),Ⅱ型胶原免疫组化定性Ⅱ型胶原。结果密度梯度离心结合贴壁细胞筛选法,最终能成获得纯度较高的hBMSCs,但传到第8代时,hBMSCs出现老化现象,因此hBMSCs不具有无限增殖的能力。hBMSCs诱导一定时间后,测得细胞分泌了大量的蛋白聚糖(PG)和Ⅱ型胶原。结论本实验分离方法可获得纯度较高的hBMSCs,在特定条件下能够向软骨细胞分化。