烟草DNA的提取与SRAP反应体系的建立

被引:58
作者
梁景霞
祁建民
吴为人
周东新
陈顺辉
王涛
陶爱芬
机构
[1] 福建农林大学生命科学院
[2] 龙岩市烟草研究所
[3] 福建省烟草科学研究所
关键词
烟草; DNA提取; SRAP反应体系;
D O I
暂无
中图分类号
S572 [烟草(菸草)];
学科分类号
摘要
以10个烟草栽培品种为试验材料,研究了烟草DNA的提取方法以及对建立烟草SRAP-PCR反应体系的影响因子设置梯度实验,筛选和建立可扩增多态性高、重复性好、带型清晰的最佳SRAP-PCR反应条件:在25μL的反应体系中,MgCl22.0mmol、dNTP200μmol,上下引物各30ng、DNA模板40ng、DNA聚合酶1.5U,扩增程序为:在94℃预变性5min,反应前5个循环在94℃1min,33℃1min,72℃1min条件下运行;随后的30个循环复性温度提高到53℃,最后72℃延伸5min。本文还讨论了不同分子标记在烟草中应用的优缺点以及SRAP分子标记在烟草上的应用前景,提出了应用SRAP分子标记构建烟草遗传图谱的可行性。
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