高质量的滇重楼胚总RNA的提取方法研究及LDPCR检测

被引：2

作者：

郑娜 ^{[1
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祁建军 ^{[2
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孙鹏 ^{[2
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秦民坚 ^{[1
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李先恩 ^{[2
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机构：

[1] 中国药科大学中药学院

[2] 中国医学科学院/中国协和医科大学/药用植物研究所

来源：

中国农学通报 | 2011年 / 27卷 / 13期

关键词：

滇重楼; 多糖; 蛋白; 总RNA; 提取;

D O I：

暂无

中图分类号：

S567.239 [];

学科分类号：

摘要：

探讨一种有效提取滇重楼胚总RNA方法。以滇重楼的胚为试验材料,将常规的SDS提取植物总RNA的方法做了改进:在RNA提取缓冲液中加入SDS的步骤上进行了调整,结合异丙醇和醋酸钠室温沉淀能更有效的去除多糖;醋酸-醋酸钠的缓冲体系维持提取液较低pH值,有效抑制RNA酶活性;将SDS的浓度提高到5%,并结合酸酚/氯仿抽提去除蛋白质污染,首次建立了一种简单有效的从滇重楼胚中提取总RNA的方法。该方法所提RNA的A260/A230均大于2.0,A260/A280的值为1.8～2.0,电泳条带清晰,RNA完整性好。利用该方法提取的滇重楼幼胚总RNA具有很高的纯度和质量,可以满足后续LD-PCR及文库构建等分子生物学研究。

引用

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