利用多重PCR反应同时筛选番茄Cf-9和Tm-1基因

被引:9
作者
宋燕 [1 ]
陈丽静 [1 ]
李君明 [1 ]
张智 [1 ]
李天来 [2 ]
徐和金 [1 ]
周永健 [1 ]
机构
[1] 中国农业科学院蔬菜花卉研究所
[2] 沈阳农业大学园艺学院
关键词
番茄; 多重PCR反应; 叶霉病; 番茄烟草花叶病毒病;
D O I
10.13430/j.cnki.jpgr.2006.02.007
中图分类号
S641.2 [番茄(西红柿)];
学科分类号
摘要
利用同一PCR反应体系,对分别与番茄抗叶霉病的Cf-9基因和抗番茄烟草花叶病毒病的Tm-1基因紧密连锁的PCR标记进行了同时扩增筛选,扩增的特异性片段与单引物扩增片段吻合。其中与Cf-9基因紧密连锁的CAPs标记在抗感试材均可扩增出560bp的特异片段,且都存在TaqI酶切位点,抗病基因型酶切后分别产生了450bp、330bp和290bp的不同特异性片段,而感病基因型试材酶切后产生450bp和290bp的特异性片段;与Tm-1基因紧密连锁的SCAR标记为显性标记,只有抗病试材产生750bp的特异片段,不能被TaqI酶切。经反复验证,结果稳定准确,可用于在同一PCR反应体系中对两个抗病基因进行同时筛选鉴定。该体系的建立不仅省时、省工、节省费用,而且可用于苗期辅助选育,加快番茄抗病育种进程。
引用
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