人OAZ突变基因的克隆构建及重组蛋白表达

被引：1

作者：

姜立 ^{[1
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马文丽 ^{[1
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柯杰兵 ^{[2
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彭翼飞 ^{[1
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李晋 ^{[3
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徐兵 ^{[4
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郑文岭 ^{[1
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机构：

[1] 南方医科大学基因工程研究所

[2] 中国人民解放军军事体育进修学院

[3] 南方医科大学人体解剖学教研室

[4] 南方医科大学附属南方医院

来源：

徐州医学院学报 | 2007年 / 03期

基金：

广东省自然科学基金;

关键词：

鸟氨酸脱羧酶抗; 突变; 蛋白表达;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q78 [基因工程（遗传工程）];

学科分类号：

071007 [遗传学];

摘要：

目的构建人鸟氨酸脱羧酶抗酶(OAZ)突变基因,重组至原核表达载体中并表达出重组蛋白。方法采用基因定点突变技术在OAZ基因TCCTGATG(199～206)位置造成第202位碱基T碱基缺失,使核糖体的阅读框+1移位,连续表达OAZ基因的ORF2部分。测序鉴定后,重组质粒转化BL21菌,进行突变基因的蛋白表达。结果重组质粒经测序后确认202位碱基T缺失,其余碱基序列无变化。重组的突变基因转入BL21后在IPTG诱导下表达OAZ全长蛋白,SDS-PAGE分析在相对分子质量45900左右出现新的蛋白条带。结论成功构建人OAZ突变基因重组质粒,转化BL21后表达出融合的OAZ全长蛋白,为进一步研究其临床应用打下基础。

引用

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