细胞培养结合实时荧光RT-PCR法快速检测7型腺病毒感染

被引：4

作者：

尚定昆 ^{[1
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申宝玲 ^{[2
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郑晓群 ^{[3
]}

彭颖 ^{[2
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林新新 ^{[2
]}

机构：

[1] 乐清市第二人民医院检验科

[2] 温州医学院检验医学院、生命科学院

[3] 温州医学院附属第二医院检验科

来源：

中华医院感染学杂志 | 2008年 / 04期

基金：

浙江省自然科学基金;

关键词：

腺病毒; 细胞培养; 实时; RT-PCR;

D O I：

暂无

中图分类号：

R450 [];

学科分类号：

100215 ;

摘要：

目的建立一种细胞培养与实时荧光RT-PCR相结合的检测7型腺病毒(ADV7)感染的技术。方法A549细胞分离培养鼻咽分泌物中的腺病毒纯化后,以感染复数(MOI)为0.1、0.5、5.0和10.0的纯化病毒感染A549细胞,分别在感染后3、6、12和24h提取总RNA进行ADV7E1A基因的实时荧光RT-PCR检测并测序验证;最后用该法直接检测鼻咽分泌物标本中的7型腺病毒。结果实时荧光RT-PCR最快可在感染后3h检测出0.5MOI病毒感染的早期转录物;感染后6h可检测出0.1MOI病毒感染的早期转录物;鼻咽分泌物标本直接感染后6h即可检测到病毒的早期转录物。结论细胞培养结合实时荧光RT-PCR法能快速、灵敏、特异地检测出感染性的7型腺病毒,具有一定的推广应用价值。

引用

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