克服RT-PCR法检测肿瘤微转移的假阳性

为探讨克服ＲＴ－ＰＣＲ法检测恶性肿瘤微转移时出现假阳性的方法，作者运用该法检测了４０例非小细胞肺癌和２０例食管癌患者病理证实有转移的淋巴结中角蛋白１９（ＣＫ１９）基因的表达，同时还分别运用套式ＲＴ－ＰＣＥ或ＲＴ－ＰＣＲ法检测了１０例良性肺和食管肿瘤患者正常淋巴结中ＣＫ１９基因的表达。结果发现设立分别以未经逆转录的ＲＮＡ和基因组ＤＮＡ为模板的对照可观察到是否存在ＣＫ１９假基因的干扰所造成的假阳性，而在逆转录前用脱氧核糖核酸酶（ＤＮａｓｅ）消化ＲＮＡ可消除这种假阳性。运用套式ＲＴ－ＰＣＥ法测定ＤＮａｓｅ消化后的正常淋巴结ＲＮＡ可发现ＣＫ１９基因非法转录所致假阳性，调整方法灵敏度，使之刚好能区分正常和转移淋巴结是解决此类假阳性的合适办法。