绿豆中苹果酸脱氢酶的性质及生物进化的研究

首次报道了豆科植物来源的苹果酸脱氢酶——绿豆苹果酸脱氢酶的纯化及表征。前期实验结果已于2005年发表于JournalofFoodBiochemistry,本文对该绿豆中苹果酸脱氢酶的性质及生物进化等做了进一步研究。结果显示:苹果酸脱氢酶对底物草酰乙酸的米氏常数为112μmol/L。酶活性受金属离子效应物影响,其中KCl对酶有激活作用,CaCl2和MgCl2对酶活影响不大,ZnCl2、PbCl2和CuSO4表现出不同程度的抑制酶活作用。锌离子对该酶的作用属于非竞争性抑制。通过Edman降解法测定其N-氨基酸序列为N-ASEPGPERKVAVL-GAAGGIG-20,与其它植物来源的苹果酸脱氢酶的同源性分别达到75%～95%。采用CLUSTALW多序列比对软件产生的进化树结构,与绿豆亲缘关系由近至远依次是大豆、苹果树、西瓜、土豆、芥菜、苜蓿、番茄。