硒对动脉平滑肌细胞增殖作用机制的探讨

目的:探讨硒(Se)拮抗同型半胱氨酸(hemocysteine,HCY)刺激大兔动脉平滑肌细胞(VSMCs)增殖的作用机制。方法:首先将兔胸主动脉VSMCs进行培养,然后加入250、500、1000、2000、4000μmol/L不同浓度的D,L-HCY,经MTT方法的检测,选择VSMCs增殖率最适宜的浓度;在加入最适宜1000μmol/LHCY的VSMCs中再分别加入50、100、200μmol/L不同浓度的硒代蛋氨酸(Se-Met)。经姬姆萨染色,通过流式细胞技术观察细胞周期,提取细胞基因组DNA进行琼脂糖凝胶电泳及谷胱苷肽过氧化物酶(GSH-Px)活性的测定。结果:不同浓度的Se-Met使HCY作用的VSMCs生长明显受到抑制(P<0.05)。但姬姆萨染色没有发现凋亡小体。流式细胞术检测到S期细胞显著减少(P<0.05),未检测到凋亡峰。基因组DNA经琼脂糖电泳也没有发现细胞凋亡的典型梯状图谱。结论:HCY的促细胞增殖作用可能是通过氧化应激介导的,而Se-Met可以拮抗HCY的促平滑肌细胞增殖作用。因实验结果未见与细胞凋亡有关,Se-Met浓度与谷胱苷肽过氧化物酶(GSH-Px)活性呈正相关,故考虑Se-Met作用机制之一是与细胞的氧化应激反应有关。