目的:确定鲜地龙平喘活性蛋白的最佳提取工艺条件。方法:以哮喘潜伏期为评价指标,通过平喘活性考察影响蛋白活性的因素;以蛋白得率为指标,通过正交试验法考察影响活性蛋白得率的因素,综合以上两个实验结果确定最佳工艺条件。结果:最佳工艺条件是:鲜地龙加2倍体积pH6.8的磷酸盐缓冲液,在低温(4°C)下匀浆并静置抽提3h,4°C离心取上清液,80硫酸铵固体盐析取沉淀。沉淀用20mmol/L、pH值为6.8的磷酸盐缓冲液悬浮,透析除盐,所得蛋白液4°C离心,上清液冷冻干燥得到地龙平喘活性蛋白(Eisenia foetida protein,EP)。结论:该工艺操作简单,稳定,得到的地龙蛋白能保持原有平喘活性。