金黄色葡萄球菌β-溶血素的原核表达及其溶血活性检测

被引：9

作者：

李冬野

崔玉东

侯喜林

朱战波

朴范泽

机构：

[1] 黑龙江八一农垦大学

来源：

中国人兽共患病学报 | 2007年 / 02期

关键词：

金黄色葡萄球菌; β-溶血素(hlb)基因; 原核表达; westernblot;

D O I：

暂无

中图分类号：

R378.1 [球菌];

学科分类号：

摘要：

目的为进一步研究金黄色葡萄球菌β-溶血素的致病性及免疫保护作用,对金黄色葡萄球菌β-溶血素进行了表达。方法应用聚合酶链式反应(PCR)技术,从金黄色葡萄球菌中扩增出β-溶血素基因,将该基因克隆到原核表达载体PET-32a中,获得重组质粒PET-32aβ-,并在大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达。对表达产物进行SDS-PAGE电泳和Westernblot检测分析,并对纯化后表达产物进行平板溶血试验,检测其溶血活性。结果PCR扩增的β-溶血素基因片段全长为982bp;表达的β-溶血素重组蛋白大小为57kD;纯化的重组蛋白可使绵羊红细胞发生明显溶血。结论结果表明所克隆的β-溶血素基因在大肠杆菌中得到了良好的表达,并保持良好的溶血活性。

引用

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