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地高辛配基标记DNA探针检测HLAⅡ类基因技术的建立
被引:2
作者:
余进
张锐发
李明
万军梅
李伯南
机构:
[1] 深圳市血液病研究所
[2] 深圳市红十字会医院
来源:
关键词:
HLA-DR;
DQ基因序列特异性寡核苷酸探针杂交;
非同位素DNA探针标记;
D O I:
暂无
中图分类号:
R346 [];
学科分类号:
1001 ;
摘要:
本文报道了采用序列特异性寡核苷酸探针杂交(SSOPH)检测HLAⅡ类基因(DRB、DQB)多态性的方法。实验包括少量全血提取模板DNA、PCR基因扩增基因多态性区域片断、尼龙膜点样、特异性寡核苷酸探针合成及地高辛配基(DIG-11-ddUTP)标记、探针杂交;条件洗涤、化学发光显影等一系列步骤。该实验方法具有用血量少、结果精确稳定、操作简便安全、不污染环境等优点。作者对模板DNA的提取、杂交缓冲液制备、标记探针的使用剂量以及条件洗涤等多个环节作了改良,使实验方法和结果进一步优化。
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