农杆菌介导石斛兰遗传转化的研究

被引：17

作者：

张妙彬

梁擎中

肖浩

岑鹏

范干群

潘丽晶

机构：

[1] 珠海市农业科学研究中心

来源：

园艺学报 | 2008年 / 04期

基金：

广东省科技计划;

关键词：

石斛兰; GUS; 根癌农杆菌; 转化; Southern杂交;

D O I：

10.16420/j.issn.0513-353x.2008.04.030

中图分类号：

S682.31 [兰科植物];

学科分类号：

090706 ;

摘要：

利用根癌农杆菌介导转化石斛兰类原球茎(PLBs),研究了石斛兰对潮霉素的敏感性,并通过gus瞬时表达率比较不同类型农杆菌、侵染液浓度及乙酰丁香酮(AS)等对石斛兰转化的影响。结果表明:带有pCAMBIA1301的根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)EHA105(简称为E1301)比带有相同表达载体的LBA4404(简称L1301)对石斛兰的转化效率更高,前者约为后者的6倍;较高浓度的侵染液转化效率更高(OD600为1.0或1.2时的转化效率约为OD600为0.6或0.8时的2倍);在农杆菌生长至OD600值为0.8时,添加AS可提高转化效率;而当OD600为0.6、1.0和1.2时,添加AS反而不同程度地降低转化效率;在各种处理中,OD600为1.0时不添加AS的转化效率最高,达44.4%。经过5～6个月选择培养,抗性小苗经GUS染色、PCR和Southern杂交检测证明为转基因植株。

引用

页码：565 / 570

页数：6

共 14 条

[1]

几种名贵洋兰转基因受体系统的建立及遗传转化.[D].李杰.南京林业大学.2005, 04

[2] 影响农杆菌介导甜瓜子叶遗传转化的因素 [J].

黄永红 ;

梅眉 ;

曾继吾 ;

周碧容 ;

吴元立 ;

易干军 .

分子植物育种, 2007, (03) :335-340

[3] 原球茎为转化受体的农杆菌介导石斛遗传转化 [J].

陈之林 ;

段俊 ;

曾宋君 ;

梁承邺 ;

叶秀粦 .

中山大学学报(自然科学版), 2007, (01) :86-90

[4] 根癌农杆菌介导的香蕉遗传转化研究进展 [J].

赵静 ;

金志强 ;

徐碧玉 .

遗传, 2006, (12) :1619-1626

[5] 根癌农杆菌介导的水稻遗传转化影响因素研究 [J].

王育花 ;

田继微 ;

肖国樱 .

江西农业学报, 2006, (03) :60-63

[6] 农杆菌介导高等植物基因转化的影响因素 [J].

刘石泉 ;

余沛涛 .

自然杂志, 2003, (01) :16-21

[7] 根癌农杆菌介导的甘蓝高效稳定的遗传转化系统的建立及对CpTI基因转化的研究 [J].

张七仙 ;

敖光明 .

农业生物技术学报, 2001, (01) :72-76+105

[8] Meropenem as an Alternative Antibiotic Agent for Suppression of Agrobacterium in Genetic Transformation of Orchid [J].

Niimi Yoshiyuki .

AgriculturalSciencesinChina, 2006, (11) :839-846

[9]

Optimization of biolistic bombardment parameters for <Emphasis Type="Italic">Dendrobium</Emphasis> Sonia 17 calluses using GFP and GUS as the reporter system.[J].Chong Siang Tee;Mahmood Maziah.Plant Cell; Tissue and Organ Culture.2005, 1

[10]

<Emphasis Type="Italic">Agrobacterium</Emphasis>-mediated genetic transformation of a <Emphasis Type="Italic">Dendrobium</Emphasis> orchid.[J].Shuzhen Men;Xiaotian Ming;Rongwei Liu;Chunhong Wei;Yi Li.Plant Cell; Tissue and Organ Culture.2003, 1

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