淫羊藿总黄酮保护衰老细胞端粒长度缩短的实验研究

目的探讨淫羊藿总黄酮 (EF)延缓人胚肺二倍体成纤维细胞衰老以及保护端粒缩短的作用机制。方法采用含EF的血清对人二倍体成纤维细胞 2BS细胞株进行处理 ,观察 2BS细胞寿命 ;采用荧光实时定量PCR法检测 p16基因mRNA的表达 ;ELISA法检测细胞视网膜母细胞瘤 (retinoblastoma ,Rb)蛋白和磷酸化Rb蛋白的含量 ;TRAP Hyb单管一步法检测细胞端粒酶活性 ;端粒限制性片段 (TRF)Southernblot法检测 2BS细胞端粒长度变化。结果淫羊藿总黄酮能够延长 2BS细胞的传代寿命 ;下调 2BS细胞p16基因mRNA的表达 ;增加磷酸化Rb蛋白的含量 ;延缓衰老细胞端粒长度的缩短 ,而不是激活细胞端粒酶活性。结论 2BS细胞衰老时 ,p16基因mRNA的表达增加 ,磷酸化Rb蛋白含量减少 ,细胞端粒长度缩短 ;淫羊藿总黄酮可能通过抑制p16基因表达 ,促进磷酸化Rb蛋白的产生 ,从而延缓衰老细胞端粒长度的缩短 ,具有延缓细胞衰老的作用 ,而不是通过激活细胞端粒酶的活性。