大鼠脊髓损伤后细胞凋亡及Caspase-3、Fas的表达和意义

目的:研究脊髓损伤后神经细胞凋亡表达及Caspase-3、Fas的表达变化规律。方法:使用改良Allen法制作大鼠急性SCI模型,实验分对照组(脊髓未受打击)和损伤5个组,致大鼠脊髓(T9、T10)中度撞击损伤,损伤后6h、1d、3d、7d、15d取材,共分6组,采用HE染色、荧光Hoechst33258染色、原位末端脱氧核糖核酸转移酶介导DUTP标记法(TUNEL)对损伤脊髓组织进行标记;免疫组化方法测Caspase-3及凋亡因子Fas,半定量逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)测定各时间段Caspase-3的表达变化。结果:大鼠急性损伤后TUNEL标记阳性凋亡细胞6h开始出现,多位于脊髓白质;3d达到高峰,在灰质和白质均有表达,7d后开始降低,持续15d;免疫组化检测Fas表达的阳性细胞6h开始增高,2d达到高峰,15d下降;Caspase-3mRNA6h开始增高,3d达到高峰,7d后恢复正常。免疫组化检测Caspase-3表达的阳性细胞与TUNEL标记阳性凋亡细胞出现的时限相似。结论:脊髓损伤后存在神经细胞凋亡现象发生,Caspase-3参与了脊髓损伤细胞凋亡的调节。Caspase-3的表达和Fas的变化有一定的相关性。