β-葡聚糖酶杂合基因bglHAM的克隆及在P.pastoris中的表达

被引：3

作者：

苏华波

韦宇拓

黄鲲

赵颖怡

黄日波

机构：

[1] 广西大学生物技术实验中心

来源：

广西大学学报(自然科学版) | 2002年 / 01期

关键词：

β1,31,4葡聚糖酶; 巴斯德毕赤酵母; 杂合基因; 克隆; 诱导表达;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q785 [转化及克隆];

学科分类号：

摘要：

采用 PCR的方法 ,以 Bacillus macerans总 DNA为模板 ,构建出β 1 ,3 1 ,4葡聚糖酶杂合基因bgl HAM,与巴斯德毕赤酵母表达载体 p PIC9K重组 ,得到重组质粒 p PIC9K HAM,电脉冲转化法转化酵母菌 GS1 1 5 ,KM71 .在 MM,MD平板上筛选表型 ,YPD G41 8平板上筛选多拷贝重组子 .重组菌株经甲醇诱导后 ,刚果红平板染色法检测到β葡聚糖酶活性 ,SDS PAGE证明表达产物的分子量约为 2 4k D,摇瓶诱导培养筛选到的重组菌株 ,胞外每 m L发酵液最高酶活达 2 40 U.

引用

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页数：4

共 4 条

[1]

生化实验方法和技术.[M].张龙翔等主编;.高等教育出版社.1997,

[2]

酶制剂应用技术.[M].姜锡瑞主编;.中国轻工业出版社.1996,

[3]

Hybrid Bacillus (1-3;1-4)-β-glucanases: engineering thermostable enzymes by construction of hybrid genes.[J].Ole Olsen;Rainer Borriss;Ortwin Simon;Karl Kristian Thomsen.MGG Molecular & General Genetics.1991, 2

[4]

Expression in Escherichia coli of a cloned β-glucanase gene from Bacillus amyloliquefaciens.[J]..Applied Microbiology and Biotechnology.1985, 1

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