牛传染性鼻气管炎病毒LUXTM新型荧光PCR检测方法的建立

被引：7

作者：

陈茹 ^{[1
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毕英佐 ^{[2
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曹永长 ^{[2
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林志雄 ^{[1
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赵吟 ^{[1
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罗琼 ^{[1
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朱道中 ^{[1
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机构：

[1] 广东出入境检验检疫局

[2] 华南农业大学动物科学院

来源：

中国预防兽医学报 | 2007年 / 04期

关键词：

牛传染性鼻气管炎病毒; LUXTM引物; 实时荧光PCR; 牛疱疹病毒1型;

D O I：

暂无

中图分类号：

S854.43 [];

学科分类号：

摘要：

本研究针对牛传染性鼻气管炎病毒（Infectious bovine rhinotracheitis virus,IBRV）高度保守的gC基因设计单标记并具有自身荧光淬灭功能的LUXTM引物,建立LUXTM新型实时荧光PCR方法用于快速检测IBRV。该方法对四株IBRV细胞培养物的检测均呈典型阳性反应,而对其它动物疱疹病毒以及健康牛组织DNA和细胞对照的检测结果为阴性,检测时间包括核酸提取仅需1h～2h。试验表明,LUXTM荧光PCR法对IBRV细胞增殖病毒液的检测敏感性可达0.04 TCID50,比病毒分离敏感性至少提高10倍;对10倍系列稀释的纯化IBRV核酸样品,LUXTM荧光PCR的检测敏感性比常规PCR可提高10～3倍。将病毒液添加到健康牛精液和血液样品中,该荧光PCR可检测到牛冻存精液中40 TCID50、牛抗凝全血、血清和临床精液中0.04 TCID50的病毒,说明对临床样品的检测有效。本研究所建立的LUXTM荧光PCR方法快速敏感,适合应用于活牛及其遗传物质的进出口检疫、养牛业疾病防控等领域对IBRV的快速检测。

引用

页码：303 / 307

页数：5