几种鹅膏菌菌种分离培养及其RAPD鉴定

采用了十几种用于分离外生菌根的培养基分离鹅膏菌.结果表明,PDM、M-76、MMN3种培养基比较适合于鹅膏菌菌种的分离.尤以PDM最佳.目前已分离成功8种鹅膏菌,它们分别为:Amanita verna、A.virosa、A.fuliginea、A.rufoferruginea、A.caesarea、A.pseudoporphyria、A.spissacea、A.manginsanea.分离部位以外(内)菌膜尚没破裂、幼嫩菌褶组织部分最好.分离后7～10d即可看到分离块的四周长出绒毛状菌丝来,菌丝生长速度很慢,一般1～2cm/月、有4种鹅膏菌经2年的多次转管、培养已能在多种培养基上生长,生长速度达2～3cm/月.为了验证分离培养所得菌种为鹅膏菌.采用从分离培养所得菌丝与该种鹅膏菌子实体提取DNA来进行RAPD扩增,同时以平菇的菌丝与子实体作对照.结果表明,从菌丝体与子实体提取的DNA的RAPD图谱完全一致.说明菌丝DNA与子实体DNA两者具有相同的随机引物结合位点,即具有相同的基因型.因此,从DNA水平上说明分离所得菌丝确为鹅膏菌菌丝.同时也说明随机扩增多态性DNA(RAPD)可作为鹅膏菌等外生菌根菌菌种分离鉴定的一种非常有效、快速的分子遗传标记.